論文No3390
Cell pellet from fixative medium of transbronchial lung biopsy sample improves lung cancer ancillary test
Juhong Jiang,Chunli Tang,Yuqin Li,...Yimin Ge,Wenhua Liang,Jianxing He
LUNG CANCER, VOLUME 175, P9-16
＜目的＞
小生検で得られた肺癌組織は比較的脆弱であり、固定液中に微小な組織片や細胞塊が残存し、
パラフィン包埋組織ブロックとして処理するために回収することが困難である。
通常、残存する固定液の細胞成分は、通常の実験室のプロトコールに従って医療廃棄物として廃棄される。
組織ブロック処理後の残留固定液の細胞成分を肺がん補助検査に活用するプロトコルは存在しない。
本研究は、肺がん診断および標的治療開発におけるこれらのサンプルの潜在的価値を明らかにすることを目的とした。
＜方法＞
経気管支鉗子肺生検サンプルの残留固定液から細胞ペレットサンプルを採取するためのプロトコルを開発した。
324例の非小細胞肺がん（NSCLC）症例から、ペレットとそれに対応する
ホルマリン固定パラフィン包埋組織切片の腫瘍細胞数および割合を評価した。
分子解析に適したセルペレットは、腫瘍細胞200個以上、腫瘍細胞10％以上と定義した。
リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応と次世代シーケンサーは、適切な細胞ペレットサンプルに対して行われた。
＜結果＞
経気管支鉗子肺生検サンプルの固定液は、ほとんどが腫瘍細胞に富んでいることを発見した。
324検体中、70検体（21.6％）は不十分なホルマリン固定パラフィン包埋組織切片であったが、
53検体（75.7％）は十分な細胞ペレット試料であった。
ホルマリン固定パラフィン包埋組織切片で検出された体細胞突然変異は、適合する細胞ペレットでも検出された。
＜感想＞
胸部小生検の固定液から採取されたセルペレットは、補助的な検査に有効な材料である。細胞ペレットを従来の組織ベース試料と併用することで、進行したNSCLC患者における有益な変異の検出率を高めることができる。
Objectives
Lung cancer tissue obtained using small biopsies are relatively fragile, leaving behind some tiny tissue fragments or cell clusters in the fixative medium that are difficult to collect for processing as a paraffin-embedded tissue block. Usually, the cellular component of the residual fixative medium is discarded as medical waste as per routine laboratory protocol. No protocol exists for utilizing the cellular component of the residual fixative medium after processing the tissue blocks to improve lung cancer ancillary testing. This study aimed to undercover the potential value of these samples for lung cancer diagnosis and targeted therapy development.
Materials and Methods
A protocol was developed for cell pellet sample collection from the residual fixative medium of a transbronchial forceps lung biopsy sample. Tumour cell number and fraction in a paired cell pellet and matching formalin-fixed paraffin-embedded tissue section were evaluated from 324 non-smallcell lung carcinoma (NSCLC) cases. We defined the adequacy of the cell pellet for molecular analysis as ≥ 200 tumour cells and ≥ 10 % tumour cells. Real-time polymerase chain reaction and next-generation sequencing were performed on adequate cell pellet samples.
Results
We discovered that the fixative medium of most transbronchial forceps lung biopsy samples was enriched in tumour cells. Among 324 biopsy samples, 70 (21.6%) exhibited inadequate formalin-fixed paraffin-embedded tissue sections, whereas 53 (75.7%) yielded adequate cell pellet samples. Somatic mutations detected in the formalin-fixed paraffin-embedded tissue section samples were also detected in the matching cell pellets.
Conclusions
Cell pellets collected from the fixative medium of thoracic small biopsies are a beneficial supplemental material for ancillary testing. Combined use of cell pellets with traditional tissue-based samples can enhance the detection rate of informative mutations in patients with advanced NSCLC.